流行性感冒（简称流感）是乃孜由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病，其主要临床表现为发热、颗粒头痛、中化鼻塞、学成咳嗽等，乃孜严重影响了人们生命健康和日常生活。颗粒近年来流感时有爆发，中化随着病毒的学成变异，使得抗病毒药物的乃孜研发越来越受到人们的关注。乃孜来颗粒（临床批件号CXZL1900019）是颗粒国医大师巴黑·玉素甫临床20余年的经验方，由一枝蒿、中化神香草、学成天山堇菜、乃孜莴苣子、颗粒破布木果、中化洋甘菊、大枣和薄荷8味药材组成，用于治疗病毒引起的上呼吸道感染、发热、头痛、鼻塞、咳嗽、流鼻涕等，临床疗效显著。前期开展并完成了制备工艺、药效学和毒理学等相关研究，但尚未系统研究其物质基础。
中药化学成分复杂，尤其是复方，但明确药物化学成分组成对于中药临床使用的安全性、有效性具有至关重要的作用，超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法（UHPLC-Q-Orbitrap-MS）因其具有高分辨率、高灵敏度、高质量精度等特点，被广泛用于中药化学成分的快速定性分析。基于此，本实验拟采用UHPLC-Q-Orbitrap-MS对乃孜来颗粒进行化学成分分析和归属，提供全面的化学轮廓，以期为其质量评价体系提升，药效作用机制和代谢特征阐释、临床合理应用等奠定基础。
UltiMate3000型超高效液相色谱仪（美国Dionex公司），Q-Orbitrap型四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪（美国ThermoFisherScientific公司），SQP型1/10万电子分析天平。
绿原酸、菊苣酸、芹菜素、没食子酸、紫云英苷、山柰苷、高车前素对照品（上海纯优生物科技有限公司，批号分别为19121609，11050701，19070308，15051904，13062403，p0571，200062707），迷迭香酸、金丝桃苷、异槲皮苷、芦丁、蒙花苷、秦皮乙素、异鼠李素、阿魏酸、原儿茶酸、木犀草素、槲皮素、山柰酚、齐墩果酸、熊果酸对照品（中国食品药品检定研究院，批号分别为111871-201505，111521-201809，111809-201804，100080-201811，111528-01509，110741-200607，110860-201611，110773-201313，110809-200604，111520-200504，100081-201408，110861-201310，0709-9803和110742-200312），异绿原酸C对照品（北京世纪奥科生物技术有限公司，批号18031603）；新绿原酸，隐绿原酸，异绿原酸A，异绿原酸B，对香豆酸，咖啡酸对照品（北京北纳创联生物技术研究院，批号分别为18031001，18032403，18032601，18031602，130316，130305）；1，3-二咖啡酰基奎宁酸，鞣花酸，木犀草苷，D-（-）-奎宁酸，异鼠李素-3-O-芸香糖苷对照品（成都普菲德生物技术有限公司，批号分别为MUST-14052604，MUST-14110807，151111，MUST-15012208，151110）；一枝蒿酮酸（中国科学院新疆理化技术研究所，批号JSP11-2530-2014）；所有对照品的纯度均≥98%。水为屈臣氏蒸馏水，甲醇、甲酸、乙腈为质谱纯，其他试剂均为分析纯。
乃孜来颗粒（批号200405）由中国科学院新疆理化技术研究所民族药关键技术与工艺工程研究中心生产，方中所含8味药材一枝蒿、神香草、破布木果、天山堇菜、薄荷、大枣、莴苣子和洋甘菊均购自新疆恩萨尔维吾尔医饮片药业有限公司（批号依次为20200902，20190708，20190901，20201225，20200914，20200402，20201201，206202007），经中国科学院新疆理化技术研究所刘戈宇研究员鉴定，大枣和薄荷符合2020年版《中华人民共和国药典》（一部）相关规定；神香草、天山堇菜、破布木果和洋甘菊均符合1999年版《中华人民共和国卫生部药品标准》（维吾尔药分册）规定；一枝蒿符合《卫生部颁药品标准》（中药材第一册）相关规定；莴苣子符合1992年版《维吾尔药材标准》（上册）相关规定。
WatersACQUITYUPLCBEHShieldRPC18色谱柱（2.1mm×100mm，1.7µm），柱温35℃，进样量2μL，流速0.3mL·min-1，流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0~3min，1%B；3~16min，1%~11%B；16~30min，11%~34%B；30~37min，34%~52%B；37~42min，52%~100%B；42~44min，100%B）。
采用电喷雾离子源（ESI），辅助气和离子传输管温度分别为300，350℃，辅助气体积流量10μL·min-1；正离子模式下喷雾电压3.5kV，鞘气体积流量40μL·min-1；负离子模式下喷雾电压2.8kV，鞘气体积流量38μL·min-1。采用正、负离子同时扫描的FullMS/dd-MS2模式，其中包括FullMS分辨率7万，dd-MS2分辨率17500，碰撞能量35eV，扫描范围m/z100~1500。
乃孜来颗粒研细后过100目筛，取0.2g，精密称定，置25mL量瓶中，加水适量，超声30min（功率500W，频率35kHz），取出，冷却至室温，用水定容至刻度，摇匀，12000r·min-1离心5min（离心半径14mm），取上清液，得8.0g·L-1提取液（以生药量计），过0.22μm微孔滤膜，作为供试品溶液备用。取各对照品约5.0mg，精密称定后置于25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，配成质量浓度均约为0.2g·L-1的单一对照品储备液；分别量取上述储备液适量，置于同一量瓶中混合后加甲醇稀释，得质量浓度均处于2~4mg·L-1的混合对照品溶液。
结合ChemSpider，PubChem，ChemicalBook数据库中化合物，以及乃孜来颗粒中单味药材的质谱信息，建立化学成分信息库，根据乃孜来颗粒的高分辨质谱数据提供的准分子离子及加合离子信息，推测一级质谱的精确相对分子质量，选择误差（δ）在5ppm（1ppm=1×10-6）以内的化合物，经Xcalibar4.0软件拟合计算相应的分子式，初步对各化学成分的分子式进行前期推测，再结合对照品、相关文献对色谱峰进行指认和归属。
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